밀몽화 추출물이 고포도당에 의한 혈관 평활근세포 증식에 미치는 효과
Effect of Buddleja officinalis on high glucose-induced vascular smooth muscle cell proliferation
- 주제(키워드) 밀몽화 추출물 , 평활근세포 증식
- 발행기관 원광대학교 대학원
- 지도교수 조은희
- 발행년도 2009
- 학위수여년월 2009. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 한의학과
- 원문페이지 48 p.
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/wonkwang/000001988977
- 본문언어 한국어
- 저작권 원광대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
Diabetes mellitus is a well-established risk factor for vascular diseases caused by atherosclerosis. In the development of diabetic atherogenesis, vascular smooth muscle cell proliferation is recognized as a key event. Thus, we aimed to investigate whether an ethanol extract of Buddleja officinalis(EBO) suppresses high glucose-induced proliferation in primary cultured human aortic smooth muscle cells (HASMC). [³H]-thymidine incorporation revealed that incubation of HASMC with high concentration of glucose (25 mM) increased cell proliferation. The expression levels of cell cycle protein were also increased by treatment with high glucose. Pretreatment of HASMC with EBO significantly attenuated the increase of high glucose-induced cell proliferation. EBO suppressed high glucose-induced matrix metalloproteinase (MMP)-2/-9 expressions and activities in a dose-dependent manner. In addition, EBO suppressed p65 NF-κB activation in a high glucose condition. Taken together, the present data suggested that EBO could suppress high glucose-induced atherosclerotic processes via inhibition of NF-κB, and MMP-2/-9 signal pathways in HASMC.
more초록/요약
당뇨병에서의 죽상경화증 발생에 혈관 평활근세포의 증식은 중요한 병태기전의 하나이다. 본 연구는 밀몽화 에탄올 추출물이 고포도당에 의해 유도된 혈관 평활근 세포의 증식을 억제시키고 그에 대한 작용기전에 대해 알아보고자 수행되었다. 밀몽화는 한국, 중국을 비롯한 동아시아에서 전통적으로 사용되어 온 약용식물로, 그 약재는 항염증 효과 등이 있다고 알려져 있다. [³H]-thymidine incorporation 결과 25 mM 고포도당은 초대배양한 혈관 평활근세포의 증식을 유도하였다. 세포증식 유도 단백질 역시 고포도당에 의해 발현이 증가하였다. 밀몽화 에탄올 추출물을 전처리시 고포도당에 의해 유도된 세포 증식은 유의성 있게 억제되었다. 죽상경화증의 중요한 표지인자인 금속함유 기질단백 분해효소 MMP-2 및 MMP-9은 고포도당에 의해 그 활성 및 발현이 증가하였으며 밀몽화 에탄올 추출물에 의해 농도 의존적으로 감소하였다. 또한 고포도당은 세포내 reactive oxygen species (ROS) 생성을 증가시켰으며, 밀몽화 에탄올 추출물의 전처리는 이러한 증가효과를 감소시키는 것으로 나타났다. 한편 고포도당 상태에서 핵 내 p65 NF-κB의 발현은 증가했으며, 밀몽화 에탄올 추출물에 의하여 농도 의존적으로 감소하였다. 그러므로 밀몽화 에탄올 추출물은 혈관 평활근세포에서 당뇨병성 죽상경화증을 억제시키는 것으로 나타났으며, 여기에 ROS 및 NF-κB의 활성 감소 등이 부분적으로 관여하는 것으로 사료된다.
more목차
Ⅰ. 緖論 = 3
Ⅱ. 實驗 材料 및 方法 = 5
1. 材料 = 5
1) 약재 = 5
2) 재료 = 5
3) 세포주 = 6
2. 方法 = 7
1) 추출물의 제조 = 7
2) 혈관 평활근세포의 배양 = 7
3) [³H]-thymidine incorporation = 7
4) MTT 정량 분석법 = 8
5) RNA 추출 = 9
6) 실시간 역전사 중합효소연쇄반응 = 9
7) 단백질 분리와 western blot 분석 = 10
8) 핵과 세포질에서 단백질 추출 = 11
9) Gelatin Zymography = 12
10) 형광법에 의한 활성산소 생성 측정 = 12
11) 통계 처리 = 13
Ⅲ. 實驗 結果 = 14
1. 고포도당에 의한 혈관 평활근세포의 증식효과 = 14
2. 고포도당에 의해 유도된 혈관 평활근세포의 증식에 대한 밀몽화 에탄올 추출물의 효과 = 15
3. 밀몽화 추출물의 matrix metalloproteinase 활성 억제 효과 = 15
4. 밀몽화 추출물의 활성산소종 생성 억제 효과 = 16
5. 밀몽화 추출물의 NF-κB 활성 억제 효과 = 16
Ⅳ. 考察 = 27
Ⅴ. 結論 = 32
Ⅵ. 參考文獻 = 33
국문초록 = 42